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睡衣上怎么提取dna

发布时间: 2023-01-06 07:14:36

① 人穿过的衣服能提取DNA吗

没有洗过的话,是有可能提取到的,因为汗渍等会残留在衣服上面

② 怎么做衣服上的DNA

学术上讲。做衣服上的DNA是对衣服上所散落的皮肤组织。指甲,毛发。体液(汗水。唾液。精液,血液)进行提取然后在仪器上进行DNA测验。费用极高

③ DNA怎么提取

DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有;硅质材料、阴离子交换树脂等。

提取DNA总的原则:

1.保证核酸一级结构的完整性;

2.核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;

3.其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;

4.其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。

例如 : 用酶法提取

DNA提取分为三个基本步骤,每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。

工具/原料: 研磨棒、研磨仪或者组织破碎仪 , 氯仿:异戊醇(24:1)或者蛋白酶 , RNA酶 , 酒精 , 冰箱

方法/步骤 :

  1. 使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。

  2. 去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。

  3. 加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。

  4. 沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。

总结: DNA提取方法有下面⑦种

一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb

二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

四.异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)

五.表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。

六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。

七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。

④ 枕巾被单枕套上面能提取到dna吗

(一)Chelex100法
原理:Chelex100是一种螯合树脂,由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成,含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,起着螯合基团作用,对多价金属离子有极强亲和力。在低离子强度、碱性及100℃煮沸条件下,可以使细胞膜裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离。检材基质中一般含有大量金属离子,在低离子强度及加热条件下,金属离子可以辅助脱氧核糖核酸酶降解DNA,也可以抑制PCR反应,所以在提取DNA时,加入Chelex100,螯合了金属离子,防止了DNA降解,提高了PCR扩增成功率。

方法:剪取适量血斑、精斑、汗斑、鼻涕斑、指甲、毛根、软组织等等生物检材,置于0.5ml离心管内,加入适量纯水,室温浸泡,13,000rpm离心5min,上清丢弃,管底留约20μl左右液体及检材基质,加入100-200μl 5%Chelex100(有时需加适量PK)56℃15min至数10小时不等,100℃8min,13,000rpm离心5mim,上清备用。

评述:
1、 Chelex100法已经成为DNA提取的基本方法,Chelex100法是万能的。目前,我们一切纯化方法都在Chelex100法的基础上进行,Chelex100法又不是万能的。
2、 Chelex100法提取前的检材清洗非常重要,因为现场检材往往均较脏,脏东西可以抑制PCR反应,所以往往不止清洗一次,清洗检材时可能损失部分DNA。所以应平衡清洗抑制剂与损失DNA之间的关系。特别强调清洗时应“把根留住”,很多情况下已知样本DNA检验失败的原因是把根没有留住。DNA检验时还有另外一句名言:“一个萝卜一个坑”,防止混乱检材。肝素抑制PCR反应,血红素抑制PCR反应,所以长时的浸泡、多次清洗往往可能洗除肝素及血红素。在已知样本多次无检验结果疑为肝素抗凝的情况下,多洗是检验成功所必须的。血红素对普通Taq酶的抑制作用是明显的,而目前mtDNA扩增一般用普通Taq酶,所以同一样品除进行STR检验外尚需进行mtDNA检测时,尽量去除干净血红素,显得尤为重要。现场提取毛发或样本毛发,用毛根进行STR检验时,纯水清洗也非常重要,如果没有清洗干净,毛根DNA本身很少,很易检出为混合型。因为现场毛发及样本毛发很易粘附另一人成份。毛根清洗的特点为振荡洗涤,不离心,多换水。
3、 清洗后检材中加入5%Chelex100量视检材而定。检材参考加入量
0.5×0.5cm血斑 150ul-200ul
二步法精斑 100ul
毛根 10ul
烟头 30-50ul
4、 对于组织,难溶检材,有疑问检材,均可加入终浓度为100ug/ml左右PK,有时间隔一段时间,补加适量PK,PK(蛋白水解酶K)作用最佳pH为8.0。
5、加入Chelex100后,56℃浸泡时间,血斑≥15min;组织≥30min,二步法精斑≥1h。
6、PCR扩增前应离心。PCR扩增时不应吸入Chelex100,因为Chelex100为PCR抑制剂。
7、Chelex100使用浓度5%,有些人用10%,有些人用20%,各人爱好。配制好5%Chelex100 pH应在10—11之间,否则应丢弃,不应人为调整Chelex100悬液pH值。

(二)有机法
原理:有机法提取DNA一般是指用平衡酚(又叫饱和酚)、氯仿等按不同比例混合,采用不同方法提取DNA。DNA易溶于水,不溶于有机溶剂,蛋白质分子表面带有亲水性基因,很容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,使蛋白质分子能够顺利地进入到水溶液中,形成稳定的胶体溶液。在有机溶剂存在的情况下,破坏了蛋白质胶体溶液的稳定性,使蛋白质变性沉淀,离心后,有机溶剂于试管底层(有机相),DNA继续稳定的存在于上层水相,蛋白质沉淀存在于两相之间。水相中的DNA在大量冷无水乙醇及单价阳离子存在的情况下,水会溶于乙醇中,而DNA从水相中析出,沉淀,通过离心回收。有机法中常用试剂为平衡酚、氯仿,酚及氯仿作用是使蛋白质变性,氯仿的另一作用是有助于水相与有机相分离,并抽提溶于水中(有时达12%)的酚。平衡酚、氯仿及乙醇,三者互溶。
方法:剪取适量检材,置于0.5ml离心管内,清洗方法同用Chelex100法提取DNA,加入适量纯水及终浓度为100μg/ml PK,37℃-56℃孵育15min至数10小时,有时间隔一段时间补加适量PK → 13,000rpm 5min→吸上清于另一管→ 加入等体积平衡酚→振荡或颠倒彻底混匀→13,000rpm 5min→吸上清水相于另一管,加入等体积1:1混合平衡酚:氯仿→振荡或颠倒彻底混匀→13,000rpm 5min→吸上清水相于另一管→加入等体积氯仿→振荡或颠倒彻底混匀→13,000rpm 5min→吸上清水相于另一管→加入2.5倍体积冷无水乙醇冷冻保存10min以上 →13,000rpm 5-10min→弃上清→室温凉干或100℃ 5min烤干→加入10-20μl纯水→室温溶解或100℃5min帮助溶解→离心上清备用
评述:
1、有机法是经典DNA提取方法,目前国内外仍大量采用,其提取DNA特点为双链,纯度高。
2、有机法缺点是应用有毒有机试剂,对人体有害,污染环境;多次换管,容易引起检材污染及编号混乱。有机法提取DNA的另一个缺点是不能去除某些染料,血红素等,而这些恰好是PCR抑制剂。

⑤ 衣服上血渍洗不掉可以提取DNA吗

是可以提取的。

⑥ 人穿过的衣服能提取DNA吗

衣服上能否提取DNA不在于衣服本身,而是衣服上是否残留了人的毛发,皮屑,指甲之类的含有DNA的部分。氧化的问题基本上不存在。

⑦ 悬赏:衣服上干涸的血里提取DNA可以吗

肯定可以,DNA非常稳定,提取可以采用实验室使用的DNA 提取试剂盒,如果有钱就买进口的比如TAKARA的,或者oxygen都可以;国产也很多,我们实验用的天根,效果也不错。操作步骤就按照protocal操作就行了。
在-20冰箱放一两个月肯定没问题,若再长期就存放到-70冰箱!