㈠ 在氨基酸纸层析实验过程中为什么不能用手接触滤纸
因手上含有少量含氨物质，在显色时也得出紫色斑点，污染层析结果。
㈡ 在纸层析和薄层层析中,手应拿住滤纸条和薄层板的什么部位为什么
手不能直接接触硅胶面（层析面），点板时拿侧边中下部，层析时直接放瓶子里，取的时候用镊子一夹住没有层析液的地方。
㈢ 纸层析实验的实验步骤及现象
氨基酸的纸层析 一、 实验目的 1.了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法。 2.学习纸层析法的操作技术，分析未知样品氨基酸的成分。 二、 实验原理 用滤纸为支持物进行层析的方法，称为纸层析法，它是分配层析法的一种。纸层析所用的展层溶剂大多是由水饱和的有机溶剂组成。滤纸纤维的—OH 基的亲水性基团，可吸附有机溶剂中的水作为固定相，有机溶剂作为流动相，它沿滤纸自下向上移动，称为上行层析；反之，使有机溶剂自上而下移动，称为下行层析。将样品点在滤纸上进行展层，样品中的各种氨基酸即在二相中不断进行分配，由于它们各自的分配系数不同，故在流动相中移动速率不等，从而使不同的氨基酸得到分离和提纯。纸层析法主要是依据混合组分对二相分配系数的差异进行分离，但亦存在着某种程度的吸附作用和离子交换现象。氨基酸经层析在滤纸上形成距原点不等的层析点，氨基酸在滤纸上的移动速率用Rf 表示。 Rf = 原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 只要实验条件(如温度、展层溶剂的组分、pH、滤纸的质量等)不变，Rf 值是常数，因此可做定性分析参考。如果溶质中氨基酸组分较多或其中某些组分的Rf 值相同或近似，用单向层析不宜将它们分开，为此可进行双向层析，在第一溶剂展开后将滤纸转动90度，以第一次展层所得的层析点为原点，再用另一种溶剂展层，即可达到分离目的。由于氨基酸无色，可利用茚三酮反应使氨基酸层析点显色，从而定性和定量。 三、仪器和试剂 仪器 层析滤纸、烧杯、剪刀、层析缸、培养皿、猴头喷雾器、微量加样器或毛细管、吹风机一个、直 尺、铅笔等。 试剂 1.混合氨基酸溶液(水解后的氨基酸干粉) 甘氨酸溶液：50mg 甘氨酸溶于5mL 水中。 蛋氨酸溶液：25mg 蛋氨酸溶于5mL 水中。 亮氨酸溶液：25mg 亮氨酸溶于5mL 水中。 氨基酸混合液： 甘氨酸50mg，亮氨酸25mg，蛋氨酸25mg 共溶于5mL 水中。 2.展层溶剂 碱相溶剂：正丁醇∶12%氨水∶95%乙醇 = 13∶13∶13(V/V) 酸相溶剂：正丁醇∶80%甲酸∶水 = 15∶3∶2(V/V)，摇匀后放置半天以上，取上清液备用。 3.显色贮备液： 0.4mol/L 茚三酮—异丙醇∶甲酸∶水=20∶1∶5。 4.0.1%硫酸铜：75%乙醇=2∶38，临用前按比例混合。 四、实验步骤 (1)标准氨基酸单向上行层析法 1.画基线 戴上指套或橡皮手套，在长约20cm、宽约17cm 滤纸上，距短边2.5cm 处，用铅笔画一条线，即为基线。 2.点样 在原线上，从距纸的长边4cm处开始，每隔3cm 用微量注射器或毛细管依次分别点上甘氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和混合氨基酸溶液。点样点干后可重复点加1～2次。每一点的直径不超过2mm，点样量以每种氨基酸含5～20ug 为宜。 3.展层 将点好样的滤纸卷成筒形，滤纸两边不相接触，用线固定好，将原线的下端浸入盛有溶剂的培养皿中，不需平衡可立即展层。展层剂为酸性溶剂系统，在展层溶剂中加入显色贮备液(每10mL 展层剂加0.1～0.5mL 的显色贮备液)进行展层，基线必须保持在液面之上，以免氨基酸与溶剂直接接触。盖好层析缸，当溶剂前沿距纸端2cm 时(大约3h)，取出滤纸。 4.显色 滤纸取出后，吹干或在80℃左右烘箱内烘3～5min，即出现紫红色的氨基酸层析 斑点。用铅笔划下层析斑点，可进行定性、定量测定。 (2)混合氨基酸双向上行纸层析法 1.滤纸准备 将滤纸裁成约28cm2的正方形，在距滤纸相邻两边各2cm 处的交点上，用铅笔划下一点，做为原点。 2.点样 取混合氨基酸溶液(5mg/mL)10～15μL，分别点在原点上。 3.展层与显色 将点好样的滤纸卷成半筒形，立在培养皿中，原点应在下端。取少量12%的氨水与小烧杯中，盖好层析缸，平衡过夜。次日，取出氨水，加适量碱相溶剂(第一向)与培养皿中，盖好层析缸，上行展层，当溶剂前沿距滤纸上端1～2cm 时，取出滤纸，冷风吹干。将滤纸转90o，再卷成半筒形，竖立在干净培养皿中，并于小烧杯中至少量酸相溶剂，盖好层析缸，平衡过夜，次日将加显色剂的酸性溶剂(每10mL 展层剂加0.1～0.5mL 的显色贮备液)倾入培养皿中，进行第2向展层。展层毕，取出滤纸，用热风吹干，蓝紫色斑点即显现。 五、计算 单向层析的Rf 值，按 “Rf = 原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离”计量后计算。双向层析Rf 值，由两个数值组成，在第一向计量一次，第二向计量一次，分别与已知的氨基酸在酸碱系统的Rf 值对比，即可初步决定它为何种氨基酸的斑点，将它剪下，在同一张纸剪下一块大小相同的空白纸作为对照，用硫酸铜—乙醇溶液洗脱，用722型分光光度计测定其吸光度，在标准曲线上查出氨基酸的含量。
㈣ 纸层析法分离氨基酸实验中展层时间的长短对结果有什么影响
氨基酸离鉴定——纸层析 ,实验目 掌握氨基酸纸层析原理,析待 测品氨基酸. 二,实验原理 纸层析滤纸惰性支持物配层析.滤纸纤维羟基具亲水性,吸附层水作固定相,机溶剂流相.机相流经固定相,物质两相间断配离. 溶质滤纸移速度用Rf值表示: Rf=原点层析斑点距离/原点溶剂前沿距离 定条件某种物质Rf值数.Rf值与物质结构,性质,溶剂系统,层析滤纸质量层析温度等素关.本实验利用纸层析离氨基酸. 三,实验器材 (1)烧杯(5000mL):1/组 (2)微量注射器(100 L):1/ 组. (3)喷雾器:公用. (4)培养皿:1/组. (5)层析滤纸(22cm,宽14cm新华号滤纸):1张/组. (6)直尺,铅笔:自备. (7)电吹风:1/组. (8)托盘,针,白线:1套/组. (9)手套:1双/组. (10)塑料薄膜:公用. (11)烧杯:50mL,1/组. 四,实验试剂 (1)扩展剂:4体积丁醇1体积冰醋酸放入液漏斗,与5体积水混合,充振荡,静置层,弃层水层. (2)氨基酸溶液:0.5%已知氨基酸溶液3种(赖氨酸,苯丙氨酸,缬氨酸),0.5%待测氨基酸液1种. (3)显色剂:0.1%水合茚三酮丁醇溶液. 实验试剂 五,实验操作 检查培养皿否干燥,洁净;若否,其洗净并置于干燥箱内120℃烘干. (1)平衡:剪块塑料薄膜铺桌面,层析缸或烧杯置于塑料薄膜,再盛约20mL展层溶液烧杯置于倒置层析缸或烧杯,用塑料薄膜密封起,平衡20min. (2)规划:带手套,取宽约14cm,高约22cm层析滤纸张.纸端距边缘2cm处轻轻用铅笔划条平行于底边直线A,直线做4记号,记号间间隔2cm,原点位置.另距左边缘1cm处画条平行于左边缘直线B,B线A,B两线交点原点标明刻度(厘米单位),参见左图. (3)点:用微量注射器别取10mL左右氨基酸品(每取前都要用蒸馏水洗涤微量注射器,免交叉污染),点四位置.挤滴点,同位置需点2～3,2～3mL/,每点完点,立刻用电吹风热风吹干再点,保证每点纸扩散直径超3mm.每须点4,其3已知,1待测品. (4)层析:用针,线滤纸缝筒状,纸两侧 边缘能接触且要保持平行,参见图3-3.向培养皿加入扩展剂,使其液面高度达1cm左右,点滤纸筒直立于培养皿(点端,扩展剂液面A线约1cm),罩烧杯,仍用塑料薄膜密封.扩展剂升A线始计,每隔定间测定扩展剂升高度,填入表3-1.升15～18cm,取滤纸,剪断连线,立即用铅笔描溶剂前沿线,迅速用电吹风热风吹干. (5)显色:用喷雾器通风厨向滤纸均匀喷0.1%茚三酮丁醇溶液,立即用热风吹干,即显各层析斑点,参见左图. (6)计算各种氨基酸Rf值,并判断混合品都哪些氨基酸,各自实验结贴实验报告,见表3-2. (7)层析间横坐标,扩展剂升高度纵坐标画图,求扩展剂升18cm所需要间. (8)微量注射器内外用蒸馏水清洗干净,倒掉用展层液平衡液,培养皿洗净,整理桌面仪器试剂
㈤ 用分配层析法分离氨基酸应注意哪些问题,为什么
氨基酸的分离鉴定——纸层析法
一,实验目的
掌握氨基酸纸层析的方法和原理,学会分析待
测样品的氨基酸成分.
二,实验原理
纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析.滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂为流动相.当有机相流经固定相时,物质在两相间不断分配而得到分离.
溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示:
Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离
在一定的条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构,性质,溶剂系统,层析滤纸的质量和层析温度等因素有关.本实验利用纸层析法分离氨基酸.
三,实验器材
(1)大烧杯(5000mL):1只/组
(2)微量注射器(100 L):1只/ 组.
(3)喷雾器:公用.
(4)培养皿:1只/组.
(5)层析滤纸(长22cm,宽14cm的新华一号滤纸):1张/组.
(6)直尺,铅笔:自备.
(7)电吹风:1只/组.
(8)托盘,针,白线:1套/组.
(9)手套:1双/组.
(10)塑料薄膜:公用.
(11)小烧杯:50mL,1只/组.
四,实验试剂
(1)扩展剂:将4体积正丁醇和1体积冰醋酸放入分液漏斗中,与5体积水混合,充分振荡,静置后分层,弃去下层水层.
(2)氨基酸溶液:0.5%的已知氨基酸溶液3种(赖氨酸,苯丙氨酸,缬氨酸),0.5%的待测氨基酸液1种.
(3)显色剂:0.1%水合茚三酮正丁醇溶液.
实验试剂
五,实验操作
检查培养皿是否干燥,洁净;若否,将其洗净并置于干燥箱内120℃烘干.
(1)平衡:剪一大块塑料薄膜铺在桌面上,将层析缸或大烧杯到置于塑料薄膜上,再把盛有约20mL展层溶液的小烧杯置于倒置的层析缸或大烧杯中,用塑料薄膜密封起来,平衡20min.
(2)规划:带上手套,取宽约14cm,高约22cm的层析滤纸一张.在纸的下端距边缘2cm处轻轻用铅笔划一条平行于底边的直线A,在直线上做4个记号,记号之间间隔2cm,这就是原点的位置.另在距左边缘1cm处画一条平行于左边缘的直线B,在B线上以A,B两线的交点为原点标明刻度(以厘米为单位),参见左图.
(3)点样:用微量注射器分别取10mL左右的氨基酸样品(每取一个样之前都要用蒸馏水洗涤微量注射器,以免交叉污染),点在这四个位置上.挤一滴点一次,同一位置上需点2～3次,2～3mL/次,每点完一点,立刻用电吹风热风吹干后再点,以保证每点在纸上扩散的直径最大不超过3mm.每人须点4个样,其中3个是已知样,1个是待测样品.
(4)层析:用针,线将滤纸缝成筒状,纸的两侧
边缘不能接触且要保持平行,参见图3-3.向培养皿中加入扩展剂,使其液面高度达到1cm左右,将点好样的滤纸筒直立于培养皿中(点样的一端在下,扩展剂的液面在A线下约1cm),罩上大烧杯,仍用塑料薄膜密封.当扩展剂上升到A线时开始计时,每隔一定时间测定一下扩展剂上升的高度,填入表3-1中.当上升到15～18cm,取出滤纸,剪断连线,立即用铅笔描出溶剂前沿线,迅速用电吹风热风吹干.
(5)显色:用喷雾器在通风厨中向滤纸上均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液,然后立即用热风吹干,即可显出各层析斑点,参见左图.
(6)计算各种氨基酸的Rf值,并判断混合样品中都有哪些氨基酸,各人将自己的实验结果贴在实验报告上,见表3-2.
(7)以层析时间为横坐标,扩展剂上升高度为纵坐标画图,求出扩展剂上升到18cm时所需要的时间.
(8)将微量注射器内外用蒸馏水清洗干净,倒掉用过的展层液和平衡液,将培养皿洗净,整理好桌面上的仪器和试剂
㈥ 做纸色谱实验时，手拿滤纸应注意什么为什么
你好，
这是因为我们的手会出汗，汗液中有水，无机盐离子，脂肪，氨基酸及多肽等。会对色谱层析产生很大影响。
希望对你有所帮助！
不懂请追问！
望采纳！