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分子生物实验为什么戴手套

发布时间: 2023-01-17 23:42:14

❶ 做生物实验手套问题

做实验室应该带手套的,一是保护自己,二也避免污染!除非是一些戴手套无法进行的实验才不带的

❷ 为什么trizol提不出来rna

trizol提不出来rna的原因有可能是以下原因:

1)你的Trizol试剂核有无问题?
2)研究材料是否新鲜,RNA容易降解,应妇80度保存。
3)如果都没问题,你的操作有无问题?


trizol提取rna的步骤:(仅供参考)

用户需自备的试剂和材料

无水乙醇、氯仿、Glycogen(可能需要)、1.5ml Eppendorf管(RNase-free)、Tips(RNase-free)

准备工作

RNase酶非常稳定,是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活,但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。它广泛存在于人的皮肤上,因此,在与RNA制备有关的分子生物学实验时,必须戴手套。

RNase的又一污染源是取液器,根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部,基本达到要求。取RNase-free的物品时必须戴手套。


料制品的处理

尽可能使用无菌,一次性塑料制品,已标明RNase-Free 的塑料制品,如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品,原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下:

  1. 在玻璃烧杯中注入去离子水,加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。注意:DEPC为剧毒物,活性很强,小心在通风柜中使用。

  2. 处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中,注入DEPC水溶液,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。

  3. 在通风柜中室温处理过夜。

  4. 将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中,用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯,高温高压蒸气灭菌至少30分钟。

  5. 烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。


璃玻和金属物品 250°C烘烤3小时以上。


从组织中提取总RNA

  1. 液氮研磨:组织块直接放入研钵中,加入少量液氮,迅速研磨,待组织变软,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol,转入离心管进行第2步操作。

  2. 匀浆:组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol。另外,组织体积不能超过Trizol体积的10%,否则匀浆效果会不好,用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。


从细胞中提取总RNA

  1. 培养贴壁细胞:不须消化,可直接用Trizol进行消化、裂解,Trizol体积按250px2/ml比例加入。

  2. 悬浮细胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞,或107细菌细胞。

操作步骤

  1. 细胞或组织加Trizol后,室温放置5min,使其充分裂解。注:此时可放入-70℃长期保持。

  2. 12,000rpm 离心5min,弃沉淀。

  3. 按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,振荡混匀后室温放置15min。注:禁用漩涡振荡器,以免基因组DNA断裂。

  4. 4℃12,000g离心15min。

  5. 吸取上层水相,至另一离心管中。注:千万不要吸取中间界面;若同时提取DNA和蛋白质,则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,则弃下层酚相。

  6. 按0.5ml异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀,室温放置5-10min。

  7. 4℃12,000g离心10min,弃上清,RNA沉于管底。

  8. 按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇,温和振荡离心管,悬浮沉淀。

  9. 4℃8,000g离心5min,尽量弃上清。

  10. 室温晾干或真空干燥5-10min。注:RNA样品不要过于干燥,否则很难溶解。

  11. 可用50ul H2O,TE buffer或0.5%SDS溶解RNA样品,55-60℃,5-10min。注:H2O、TE或0.5%SDS均须用DEPC处理并高压。

  12. 测O.D值定量RNA浓度。注:此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之间;产率估计:组织标本:(ug RNA/mg组织)1-10ug,培养细胞(ug RNA/106 Cell):5-15ug。

注:组织或细胞量过少,可酌情减少Trizol用量;组织或细胞用量过多,会引起DNA对RNA的污染;

高蛋白、脂肪或多糖类组织,肌肉组织或块状植物组织等,组织匀浆或液氮研磨后须4℃12,000g离心10min去掉不溶物,再进行下面操作,若顶层有脂肪物,则也须去掉;

热天提RNA,带手套是必须的,手是RNase的主要来源;

组织块用液氮研磨,效果最好,若没有液氮或电动匀浆器,可用手动匀浆器代替,此时组织块不宜过大,且需先用眼科剪刀将组织碱碱剪碎,然后再充分研磨。

❸ 实验室手套的作用有哪些

实验室手套的作用主要是用来保护手的,它具有的要求是防酸防碱,耐腐蚀,这样的特点是最为重要的。

❹ 生物学为什么戴白手套

1、白手套内不含色素杂质等,对实验的影响小;
2、白手套是白色背景,观察现象比较明显;

❺ 实验室手套的作用

你好首先手套起着保护作用,防止影响到实验数据,同时也是可以保证自己的精准

❻ 实验室为什么要戴防醇类的手套

天然橡胶乳胶手套通常没有衬里,并有多种款式,包括清洁款式和无菌款式。 这些手套能针对碱类、醇类,以及多种化学稀释水溶液提供有效地防护,并能较好地防止醛和酮

❼ 为什么实验过程中要穿实验服,戴橡胶手套

为确保实验人员生物安全,环境不受污染,样本质量不受影响,对于可能具有传染性的样本和培养物,在操作时均应带手套。

❽ 做化学实验时为什么要带防护手套

做化学实验有时不能戴手套。
化学实验中有一个重要的环节,那就是检验气密性。检验气密性的时候,要用手握住试管,然后将导管插入水中,观察是否有气泡冒出。如果带了手套,手套导热性不好,那么就很难加热试管,无法检验气密性。

❾ 在生物类实验室,可以带手套开房门,柜子门和冰箱门等.为什么

不可以。手套上可能有微生物,会污染冰箱内的菌种

❿ 为什么称取样品及将样品置于提取管内时要带手套

手上可能有汗水,尤其是夏季。如果你要称取的试样跟水能发生化学反应,结果就会不准确,甚至可能弄伤手。戴上干燥手套,就可以避免这些问题了。

此外,手套要保持洁净,是为了防止灰尘或者其他杂物混进试样,可以获得准确的结果。

取样是指从总体中抽取个体或样品的过程,也即对总体进行试验或观测的过程。分随机抽样和非随机抽样两种类型。

前者指遵照随机化原则从总体中抽取样本的抽样方法,它不带任何主观性,包括简单随机抽样、系统抽样、整群抽样和分层抽样。后者是一种凭研究者的观点、经验或者有关知识来抽取样本的方法,带有明显主观色彩。参见“随机抽样”、“非随机抽样”。