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分子生物實驗為什麼戴手套

發布時間: 2023-01-17 23:42:14

❶ 做生物實驗手套問題

做實驗室應該帶手套的,一是保護自己,二也避免污染!除非是一些戴手套無法進行的實驗才不帶的

❷ 為什麼trizol提不出來rna

trizol提不出來rna的原因有可能是以下原因:

1)你的Trizol試劑核有無問題?
2)研究材料是否新鮮,RNA容易降解,應婦80度保存。
3)如果都沒問題,你的操作有無問題?


trizol提取rna的步驟:(僅供參考)

用戶需自備的試劑和材料

無水乙醇、氯仿、Glycogen(可能需要)、1.5ml Eppendorf管(RNase-free)、Tips(RNase-free)

准備工作

RNase酶非常穩定,是導致RNA降解最主要的物質。它在一些極端的條件可以暫時失活,但限制因素去除後有迅速復性。用常規的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑都不能是RNase完全失活。它廣泛存在於人的皮膚上,因此,在與RNA制備有關的分子生物學實驗時,必須戴手套。

RNase的又一污染源是取液器,根據取液器製造商的要求對取液器進行處理。一般情況下採用用DEPC配製的70%乙醇擦洗取液器的內部和外部,基本達到要求。取RNase-free的物品時必須戴手套。


料製品的處理

盡可能使用無菌,一次性塑料製品,已標明RNase-Free 的塑料製品,如沒有開封使用過通常沒有必要再次處理。對於國產塑料製品,原則上都必須處理方可使用。處理步驟如下:

  1. 在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使DEPC的終濃度為0.1%。注意:DEPC為劇毒物,活性很強,小心在通風櫃中使用。

  2. 處理的塑料製品放入一個可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC水溶液,使塑料製品的所有部分都浸泡到溶液中。

  3. 在通風櫃中室溫處理過夜。

  4. 將DEPC水溶液小心倒到廢液瓶中,用鋁箔封住含已DEPC水處理過的塑料製品的燒杯,高溫高壓蒸氣滅菌至少30分鍾。

  5. 烘箱用合適的溫度烘拷至乾燥。置於干凈處備用。


璃玻和金屬物品 250°C烘烤3小時以上。


從組織中提取總RNA

  1. 液氮研磨:組織塊直接放入研缽中,加入少量液氮,迅速研磨,待組織變軟,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg組織/ml Trizol加入Trizol,轉入離心管進行第2步操作。

  2. 勻漿:組織樣品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol。另外,組織體積不能超過Trizol體積的10%,否則勻漿效果會不好,用電動勻漿器充分勻漿約需1-2分鍾。


從細胞中提取總RNA

  1. 培養貼壁細胞:不須消化,可直接用Trizol進行消化、裂解,Trizol體積按250px2/ml比例加入。

  2. 懸浮細胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106動物、植物或酵母細胞,或107細菌細胞。

操作步驟

  1. 細胞或組織加Trizol後,室溫放置5min,使其充分裂解。註:此時可放入-70℃長期保持。

  2. 12,000rpm 離心5min,棄沉澱。

  3. 按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,振盪混勻後室溫放置15min。註:禁用漩渦振盪器,以免基因組DNA斷裂。

  4. 4℃12,000g離心15min。

  5. 吸取上層水相,至另一離心管中。註:千萬不要吸取中間界面;若同時提取DNA和蛋白質,則保留下層酚相存於4℃冰箱,若只提RNA,則棄下層酚相。

  6. 按0.5ml異丙醇/ml Trizol 加入異丙醇混勻,室溫放置5-10min。

  7. 4℃12,000g離心10min,棄上清,RNA沉於管底。

  8. 按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇,溫和振盪離心管,懸浮沉澱。

  9. 4℃8,000g離心5min,盡量棄上清。

  10. 室溫晾乾或真空乾燥5-10min。註:RNA樣品不要過於乾燥,否則很難溶解。

  11. 可用50ul H2O,TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,55-60℃,5-10min。註:H2O、TE或0.5%SDS均須用DEPC處理並高壓。

  12. 測O.D值定量RNA濃度。註:此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之間;產率估計:組織標本:(ug RNA/mg組織)1-10ug,培養細胞(ug RNA/106 Cell):5-15ug。

註:組織或細胞量過少,可酌情減少Trizol用量;組織或細胞用量過多,會引起DNA對RNA的污染;

高蛋白、脂肪或多糖類組織,肌肉組織或塊狀植物組織等,組織勻漿或液氮研磨後須4℃12,000g離心10min去掉不溶物,再進行下面操作,若頂層有脂肪物,則也須去掉;

熱天提RNA,帶手套是必須的,手是RNase的主要來源;

組織塊用液氮研磨,效果最好,若沒有液氮或電動勻漿器,可用手動勻漿器代替,此時組織塊不宜過大,且需先用眼科剪刀將組織鹼鹼剪碎,然後再充分研磨。

❸ 實驗室手套的作用有哪些

實驗室手套的作用主要是用來保護手的,它具有的要求是防酸防鹼,耐腐蝕,這樣的特點是最為重要的。

❹ 生物學為什麼戴白手套

1、白手套內不含色素雜質等,對實驗的影響小;
2、白手套是白色背景,觀察現象比較明顯;

❺ 實驗室手套的作用

你好首先手套起著保護作用,防止影響到實驗數據,同時也是可以保證自己的精準

❻ 實驗室為什麼要戴防醇類的手套

天然橡膠乳膠手套通常沒有襯里,並有多種款式,包括清潔款式和無菌款式。 這些手套能針對鹼類、醇類,以及多種化學稀釋水溶液提供有效地防護,並能較好地防止醛和酮

❼ 為什麼實驗過程中要穿實驗服,戴橡膠手套

為確保實驗人員生物安全,環境不受污染,樣本質量不受影響,對於可能具有傳染性的樣本和培養物,在操作時均應帶手套。

❽ 做化學實驗時為什麼要帶防護手套

做化學實驗有時不能戴手套。
化學實驗中有一個重要的環節,那就是檢驗氣密性。檢驗氣密性的時候,要用手握住試管,然後將導管插入水中,觀察是否有氣泡冒出。如果帶了手套,手套導熱性不好,那麼就很難加熱試管,無法檢驗氣密性。

❾ 在生物類實驗室,可以帶手套開房門,櫃子門和冰箱門等.為什麼

不可以。手套上可能有微生物,會污染冰箱內的菌種

❿ 為什麼稱取樣品及將樣品置於提取管內時要帶手套

手上可能有汗水,尤其是夏季。如果你要稱取的試樣跟水能發生化學反應,結果就會不準確,甚至可能弄傷手。戴上乾燥手套,就可以避免這些問題了。

此外,手套要保持潔凈,是為了防止灰塵或者其他雜物混進試樣,可以獲得准確的結果。

取樣是指從總體中抽取個體或樣品的過程,也即對總體進行試驗或觀測的過程。分隨機抽樣和非隨機抽樣兩種類型。

前者指遵照隨機化原則從總體中抽取樣本的抽樣方法,它不帶任何主觀性,包括簡單隨機抽樣、系統抽樣、整群抽樣和分層抽樣。後者是一種憑研究者的觀點、經驗或者有關知識來抽取樣本的方法,帶有明顯主觀色彩。參見「隨機抽樣」、「非隨機抽樣」。